Универсальность ИФА-теста позволяет применять его для выявления бактериальных и вирусных заболеваний
Тест ИФА является количественным – он определяет наличие и количество антител. Применяется для диагностики методом выявления наличия в сыворотке, взятой у больного, антител, которые появляются в результате контакта с возбудителем. ИФА — это аббревиатура полного названия, звучащего как иммуноферментный анализ. Тест был разработан в 1960-х годах, открытие привело к внедрению диагностики, заключающейся в использовании ферментов, реагирующих с антигенами, характеризующимися специфическими антителами.
Первоначально ИФА использовался только для обнаружения антител путем тестирования сыворотки. Однако вскоре он оказался подходящим инструментом для анализа количества антигенов в данном образце. Эффективность ИФА-теста сделала его сильным конкурентом другим видам анализов. Универсальность ИФА-теста позволяет использовать его не только в медицине, но и в токсикологии, сельском хозяйстве или пищевой промышленности в качестве детектора аллергенов.
Компания «ЭКВИТЕСТЛАБ» предлагает купить ИФА наборы реагентов для диагностики в Украине, они применяются в клинических диагностических лабораториях и других учреждениях, работающих в области in vitro диагностики. Компания «ЭКВИТЕСТЛАБ» – украинский производитель и разработчик медицинских изделий для диагностики in vitro. ИФА наборы реагентов для диагностики можно приобрести в каталоге на сайте equitest.com.ua, диагностические и аналитические характеристики ИФА-наборов подтверждены международными стандартами ВОЗ.
ИФА тест – что это такое, зачем и когда делать?
ИФА-тест заключается во внесении в пробирки со специфическими бактериями сыворотки больного, в которой потенциально присутствуют антитела. Технически тест проводится на пластинах из полистирола или плексигласа. В каждой по 96 отверстий в 8 рядах и 12 столбцах. Образцы анализируют отдельно в каждой лунке. Во время теста планшет покрывают соответствующим антителом или антигеном. Кроме того, используют обезжиренное молоко или раствор яичного альбумина, чтобы избежать неселективного связывания белков с фазой на последующих этапах анализа.
Реакции ферментов с антителами видны по появлению окраски. Наиболее часто используемые ферменты в тесте ИФА включают:
- щелочная фосфатаза – окрашивает в желтый цвет, превращая п-нитрофенолфосфат в п-нистрофенол,
- глюкозооксидаза – вызывает коричневую окраску при контакте с 5-аминосалициловой кислотой,
- пероксидаза хрена – дает синюю окраску при контакте с тетраметилбензидином.
Во время теста ИФА изменение цвета анализируется с использованием спектрометрического метода, т. е. путем измерения пропускания света через образец. Затем его сравнивают с контрольными образцами в виде нескольких растворов с известными разведениями, которые также помещают на пластину и подвергают таким же обработкам.
Существует несколько вариантов теста, в том числе:
- прямой ИФА-тест – простой и быстрый метод, но дорогой и не всегда возможный, заключается в покрытии субстрата антигеном и инкубации с раствором специфического антитела, связанного с соответствующим ферментом; содержание белка в образце оценивают на основании интенсивности окраски, полученной после добавления соответствующего субстрата,
- непрямой ИФА – наиболее часто используемый тип теста, не требующий мечения первичных антител, специфичных к антигену; во время теста планшет покрывают антигеном, а затем инкубируют с раствором немеченого первичного антитела, которое связывается только с тестируемым белком; непрямой ИФА даст окраску только после контакта полученного комплекса со вторичным антителом,
Что диагностирует тест ИФА? В связи с тем, что он дешевый, быстрый и чрезвычайно чувствительный, он широко используется в первую очередь в медицине. Используется для выявления бактериальных и вирусных заболеваний.